ИННОВАЦИИ БИЗНЕСУ

Номер

24-025-06

Наименование проекта

Способ диагностики инфекционных заболеваний

Назначение

Дешевая иммунохимическая экспресс-диагностика инфекционных заболеваний.

Рекомендуемая область применения

Для диагностики инфекционных заболеваний в ветеринарных и медицинских лабораториях.

Описание

Описание к ИЛ № 24-025-06

            Результат выполнения научно-исследовательской работы.

Способ относится к области иммунохимической бесприборной экспресс-диагно-стике заболеваний. Данный способ может быть использован для экспресс-диагностики таких заболеваний как туберкулез.

Основу предлагаемого способа составляет реакция гидрозольной агглютинации, основанная на взаимодействии «антиген - антитело», т.е. классическая иммунохимическая реакция, основанная на взаимодействии антитела и антигена и образования в результате этого взаимодействия иммунного комплекса. Реакция позволяет выявить антитела к известному антигену в результате того, что антиген, сорбированный на твердофазном носителе, связывается со специфическими антителами. Сорбция указанных препаратов осуществляется в основном по ионному механизму, причем биолиганд, как правило, находится в наружной части образовавшейся мицеллы.

Гидрозольные препараты, созданные на основе берлинской лазури, представляют собой коллоидные растворы гексацианоферрат (II) железа (III) Fe[Fe(CN)₆]3, стабилизированные модификатором, на поверхности которых адсорбированы по определенной технологии биоспецифические лиганды - комплексный туберкулезный диагностикум (ППД), либо парвовирусный антиген (болезнь птиц, вызываемая вирусом «нью- касл»). Для диагностического применения белок смешивается с гидрозолем в соотношении 1:60 (10 мкл антигена на 600 мкл гидрозоля).

Методы: разведение сывороток в ряде лунок полистирольного стрипа. Использовали разведения от 1:10 до 1:320. На предметное стекло, хроматографические колонки наносили 1:1, 1:2, 1:2,5 соответствующую сыворотку и гидрозоль. Для регистрации использовали пористые носители: хроматографические колонки двух видов, нетканый материал и фильтровальную бумагу. Также использовали постановку в колонках с гидрофобной основой с дальнейшим переносом на пористый носитель.

Полученные гидрозоли позволяют осуществлять детекцию антигенов либо антител, комплементарных сорбированному на поверхности микрочастиц биолиганду, в различных биологических жидкостях. Были получены типичные результаты «плюс» и «минус», т. е. гидрозоль четко дифференцировал сыворотку (+) и (-). Время реакции - от 30 с. до 2 мин.

Оценка результатов и их интерпретация на пористых носителях: при наличии достаточно высокого титра AT в сыворотке наблюдалась задержка в пропитывании гидрозолем порошка, заполняющего хроматографическую колонку, в виде короткого столбика синего цвета. При отсутствии AT - гидрозоль впитывается, что дает длинный синий столбик - отрицательный результат. В хроматографической колонке без пористого носителя наблюдались следующие результаты: в колонке с (+) сывороткой на дне осадок и раствор прозрачный, в колонке с (-) сывороткой - однородный мутный раствор синего цвета.

Результаты на нетканом материале и на фильтровальной бумаге: при положительной реакции - плотный, компактный комплекс с четкой границей, диаметром 2-4 мм; при отрицательной реакции - распределение частиц реагирующих веществ без четкой границы в виде пятна синего цвета.

Преимущества перед известными аналогами

Экспрессность и простота проведения анализа (постановка реакции и считывание результатов не более 1-2 мин.). Данные гидрозольные препараты дают возможность ставить реакции с малыми объемами биоматериала.

Стадия освоения

Опробовано в условиях опытной эксплуатации

Результаты испытаний

Способ обеспечивает получение стабильных результатов

Технико-экономический эффект

1. Снижение трудоемкости и повышение производительности труда в 3 раза. 2. Экономия материалов в 2 раза.

Возможность передачи за рубеж

Возможна передача за рубеж

Дата поступления материала

12.09.2006