ИННОВАЦИИ БИЗНЕСУ

Номер

24-006-06

Наименование проекта

Метод определения активности ангиотензинпревращающего фермента в сыворотке крови

Назначение

Сохранение здорового высокопродуктивного стада животных.

Рекомендуемая область применения

Для количественного определения активности ангиотензинпревращающего фермента в сыворотке крови с целью диагностики возможных заболеваний животных.

Описание

Описание к ИЛ № 24-006-06

            Результат выполнения научно-исследовательской работы.

Принцип метода. Для количественного определения активности ангиотензин-превращающего фермента используют субстрат - фурилакрилоилфенилаланинглицил-глицин, от которого фермент отщепляет дипептид - глицилглицин, в результате чего изменяется оптическая плотность, что фиксируется спектрофотометрическим способом.

Приборы: спектрофотометр, термостат.

Реактивы:

1. Натрия этилендиаминтетраацетат (ЭДТА), раствор 20 мМ.

2. Буферный раствор (50 мМ трис-(оксиметил)-аминометан, 300 мМ натрия хлорид, рН 8,3).

3.   Фурилакрилоилфенилаланинглицилглицин (ФАПГГ), раствор 1 мМ.

Ход определения

В две пробирки (опытную и контрольную) последовательно вносят по 0,02 мл сыворотки крови. Затем в опытную пробирку добавляют 0,1 мл раствора субстрата -фурилакрилоилфенилаланинглицилглицина (ФАПГГ) в концентрации 1 мМ, в контрольную пробирку вносят 0,1 мл 20 мМ ЭДТА.

Пробы инкубируют в термостате при температуре 37^оС в течение 30 мин. Затем пробирки помещают в ледяную баню и в опытную добавляют 0,1 мл 20 мМ ЭДТА, а в контрольную - 0,1 мл 1 мМ ФАПГГ и тщательно перемешивают. Через 5 мин. в обе пробирки вносят по 2,3 мл буферного раствора (50 мМ трис-(оксиметил)-аминометана, 300 мМ NaCl, рН 8,3) и спектрофотометрируют при длине волны 334 нм против дистиллированной воды. Различие между экстинкциями контрольной и опытной проб указывает на активность фермента.

Количественные сдвиги показателей активности ангиотензинпревращающего фермента в сыворотке крови позволяют судить о состоянии функций печени и почек. Поэтому определение активности ангиотензинпревращающего фермента в сыворотке крови в конечном итоге направлено на сохранение здоровья и поголовья высоко­продуктивных животных.     

Преимущества перед известными аналогами

Метод прост, хорошо воспроизводим.

Стадия освоения

Внедрено в производство

Результаты испытаний

Технология обеспечивает получение стабильных результатов

Технико-экономический эффект

Снижение трудоемкости в 2 раза.

Возможность передачи за рубеж

Возможна передача за рубеж

Дата поступления материала

11.09.2006