ИННОВАЦИИ БИЗНЕСУ

Результат выполнения научно-исследовательской работы.

Метод относится к области ветеринарной диагностики и может быть использован для экспресс-определения каталазной и пероксидазной активности различных микроорганизмов (в их суспензиях).

Применение этого метода позволяет при антимикробной терапии осуществить правильный выбор дозы лекарственного препарата, если действие его основано на ускорении перекисного окисления липидов в микроорганизмах.

Принцип метода основан на том факте, что в присутствии каталазы и/или пероксидазы при добавлении избытка перекиси водорода, последняя частично разлагается. Непрореагировавшая по этой реакции перекись водорода разлагает иодид калия с выделением свободного йода, и крахмал окрашивается в синий цвет.

Реактивы:

- 0,001-0,0005% раствор перекиси водорода,

- 5% раствор йодида калия,

- 0,1-0,2% раствор крахмала.

Ход работы:налить в пробирку 1 мл раствора йодида калия, добавить 5-6 капель раствора крахмала, 0,5 мл пробы, представляющей собой суточную культуру исследуемого микроорганизма в требуемом разведении. Затем добавить 0,5 мл перекиси водорода и через 2 мин. колориметрировать на ФЭК при синем светофильтре против контрольной пробы, для приготовления которой берутся все те же ингредиенты, но вместо перекиси водорода добавляется 0,5 мл воды.

Калибровочный график строится с помощью серии, содержащей известное количество перекиси водорода (в первую пробирку серии добавляется 0,1 мл перекиси водорода и 0,4 мл воды; во вторую 0,15 мл перекиси водорода и 0,35 мл воды... и т.д. до 0,5 мл перекиси водорода).

Таким образом, при сравнении данных экстинкции исследуемой пробы с калибровочным графиком определяют С_n- количество оставшейся (непрореагировавшей) перекиси водорода, и соответственно каталазно-пероксидазную активность микроорганизмов определяют по количеству перекиси водорода, разложенной за 1 мин.