ИННОВАЦИИ БИЗНЕСУ

ПОДРОБНАЯ ИНФОРМАЦИЯ

Заявку на получение дополнительной информации по этому проекту можно заполнить здесь.

Номер

24-005-04

Наименование проекта

Индигокарминовый метод определения каталазной и пероксидазной активности микроорганизмов

Назначение

Снижение затрат при диагностике и лечении животных.

Рекомендуемая область применения

Для количественного определения каталазной и пероксидазной активности микроорганизмов (в их суспензиях) с целью правильного подбора дозы препарата.

Описание

Результат выполнения научно-исследовательской работы.

Метод относится к области ветеринарной диагностики и может быть использован для экспресс-определения каталазной и пероксидазной активности различных микроорганизмов (в их суспензиях).

Каталазы и пероксидазы - одни из важнейших ферментов, предотвращающих перекисное окисление липидов. Эти ферменты продуцируются как клетками многих тканей орга­низма человека и теплокровных животных, так и многими микроорганизмами. А поскольку ряд методов антимикробной терапии направлен именно на ускорение перекисного окисления липидов в микроорганизмах, особое значение имеет подбор такой дозы препарата, при кото­рой активность микроорганизмов подавлялась бы, но клетки организма при этом не повреждались. Поэтому особое значение имеет разработка метода количественной оценки каталазной и пероксидазной активности микроорганизмов.

Реактивы:

- ацетатный буфер (рН - 4,9), получаемый смешиванием 0,2 М растворов уксусной ки­слоты и ацетата натрия в соотношении 3,5:6,5;

- индигокармин (0,0233 г в мерной колбе, долить до 100 мл дистиллированной водой);

- 0,03 М раствор перекиси водорода (0,33 мл 30% перекиси водорода, довести дистил­лированной водой в мерной колбе до 100 мл);

- 20% серная кислота.

Ход работы: налить в пробирку 1 мл ацетатного буфера, 1 мл индигокармина, 0,5 мл про­бы, представляющей собой суточную культуру исследуемого микроорганизма в требуемом разведении. На 5 мин. поместить пробирку на водяную баню, затем добавить 0,5 мл перекиси водорода и ровно через 2 мин. (по секундомеру) - 3 мл 20% серной кислоты.

Колориметрирование производится при красном светофильтре (610 нм) против контрольной пробы, для приготовления которой берутся все те же ингредиенты, но вместо перекиси водорода добавляется 0,5 мл воды.

Расчет каталазно-пероксидазной активности ведется по формуле

,

где (Еk- Еo) - разность экстинкций контрольной и опытной пробы;

d-толщина кюветы;

Еn-конечный объем в мл;

Аn- исходный объем в мл;

е - молекулярная экстинкция индигокармина;

t- время реакции;

Сm-концентрация микроорганизмов (микробных тел в объеме пробы).

Преимущества перед известными аналогами

Экспрессность и простота выполнения анализа, возможность скрининг-тестов.

Стадия освоения

Опробовано в условиях опытной эксплуатации

Результаты испытаний

Технология обеспечивает получение стабильных результатов

Технико-экономический эффект

Снижение трудоемкости и повышение производительности труда в 2 раза. Экономия материалов в 2 раза.

Возможность передачи за рубеж

Возможна передача за рубеж

Дата поступления материала

12.01.2004

Инновации и люди

У павильонов Уральской выставки «ИННОВАЦИИ 2010» (г. Екатеринбург, 2010 г.)

Мероприятия на выставке "Инновации и инвестиции - 2008" (Югра, 2008 г.)

Открытие выставки "Малый бизнес. Инновации. Инвестиции" (г. Магнитогорск, 2007 г.)

Демонстрация разработок на выставке "Малый бизнес. Инновации. Инвестиции" (г. Магнитогорск, 2007 г.)