ИННОВАЦИИ БИЗНЕСУ

Данный материал является результатом научно-исследовательской работы ВГМА.

Иммунодефицитное состояние, вызванное функционированием в крови естественного ингибирующего фактора (ЕИФ), диагностируется с помощью постановки реакции ингибирования активности макромолекулярных антител (РИА) повторно с интервалом 10-14 дней, т.к. установлено, что функционирование ЕИФ свыше этого срока ведет к подавлению образования антител.

Метод состоит в следующем: определение изменения агглютинирующих свойств тест-сыворотки с зараннее известным титром после ее контакта с сывороткой крови больного. Тест-сывороткой может служить кроличья агглютинирующая неадсорбированная брюшнотифозная сыворотка или кроличья гемолитическая агглютинирующая сыворотка, содержащиеig mантитела.

Для постановки РИА тест-сыворотку разводят стерильным физиологическим раствором 1:40 (при отсутствии венозной крови сыворотку можно получить из крови, взятой из пальца, в количестве 0,5 мл.). Оба раствора (тест-сыворотки и сыворотки крови больного) соединяют в равных объемах (по 1,0 мл.) в пробирках емкости 2,0 мл., плотно закрытых резиновыми пробками для прекращения поступления кислорода воздуха (с целью предотвращения окисления активных сульфгидрильных групп естественного ингибирующего фактора). В качестве контроля используются смесь - разведенной 1:20 тест-сыворотки и физиологического раствора (по 1,0 мл.). Смеси выдерживают 18 часов при +37 ⁰ С, т.е. до следующего дня. Минимальный допустимый срок инкубационного периода составляет 2 часа. Затем с полученными смесями ставят реакцию агглютинации классическим способом: начинают с разведения 1:80 и используют соответствующий диагностикум (стандартный брюшнотифозный или 0,5% взвесь эритроцитов барана). Диагностикум добавляют в каждую пробирку в количестве 0,1 мм.

При оценке результатов реакции имеет значение не только титр, но и интенсивность реакции агглютинации, которая выражается суммарным титром. Суммарный титр(СТ) представляет собой сумму показателей интенсивности реакции агглютинации, оцениваемой по четырехкрестовой системе, во всех разведениях тест-сыворотки. Затем рассчитывается индекс ингибирования РИА (ИИ РИА), который определяется как отношение СТ тест-сыворотки, определяемого после ее контакта с сывороткой крови больного. Реакция ингибирования активности антител считается положительной, если ИИ РИА = 1,2.

Метод позволяет осуществлять воздействие активных сульфгидрильных групп ЕИФ на макромолекулярные антитела тест-сыворотки любой специфичности, и повысить точность клинического диагноза.