ИННОВАЦИИ БИЗНЕСУ

Ингибиторы - вещества, избирательно подавляющие деятельность определенных ферментов, успешно применяются для лечения заболеваний, связанных с нарушением обмена веществ. Многие лекарственные вещества, используемые в медицине и ветеринарии, по механизму действия представляют собой ингибиторы биохимических реакций.

Организм вследствие интоксикации, вызванной возбудителем или какой-либо иной причиной, например, из-за стрессового состояния, не способен адекватно реагировать и повреждение его тканей нельзя считать приспособительной реакцией. Регуляция протеолиза происходит несколькими путями, в том числе присутствием в крови специфических веществ-ингибиторов протеолитических ферментов. Когда их содержание уменьшается, интенсивность протеолиза при прочих равных условиях увеличивается.

По содержанию ингибиторов протеолиза в плазме крови можно судить об интенсивности протеолиза в организме: увеличенная норма свидетельствует о начинающем воспалении.

Для определения содержания ингибиторов плазму добавляли к препарату, содержащему протеолитический фермент (трипсин) и инкубировали 15 минут при температуре 25 ^оС. Затем к пробе добавляли субстрат (препарат очищенного казеина) и пробу подвергали второй инкубации (30 минут при температуре 25 ^оС). По окончании времени инкубации реакцию останавливали 5% раствором трихлоруксусной кислоты, пробу центрифугировали 20 минут при п=500 об/мин и определяли количество продуктов гидролиза белка.

Определение количества продуктов гидролиза проводили спектрофотометрическим методом при длине волны 280 пт. Так как субстрат брали в избытке, количество продуктов гидролиза, определяемое в пробе, можно принять пропорциональным начальной скорости реакции.

Активность ингибитора определяли по разнице между начальными скоростями реакции в присутствии ингибитора и без него.

Было установлено, что активность ингибиторов протеолитических ферментов в плазме крови коров, больных острым эндометритом, значительно меньше, чем в плазме крови здоровых коров (результат статистически достоверный, т.е. уровень значимости Р=0,05.

Предположительный механизм изменения ферментативного фона при остром эндометрите - неадекватная реакция организма на токсические продукты возбудителей, вызывающих заболевание. Поэтому введение в матку препарата, содержащего высокоактивный ингибитор протеолитических ферментов, дает положительный эффект.

Были проведены эксперименты с целью обнаружить ингибитор в растениях. Для этого исследовали ряд трав по методике, аналогичной описанной выше, только вместо плазмы брали отвар исследуемой травы. В ходе этих опытов было обнаружено, что отвар зверобоя содержит фактор, ингибирующий реакцию протеолиза (уровень значимости Р=0,05). Эффект наблюдался при работе с карбонатным буфером при Рl=8,9.